非洲豬瘟檢驗方法與防控關鍵:從實驗室檢測談起
作者/KingNet國家網路醫藥 林招煌
非洲豬瘟(ASF)是高致死率、高傳染性的豬隻病毒性疾病,對畜牧產業威脅極大。由ASF病毒(ASFV)引起,臨床症狀包括高熱、皮膚出血及脾臟腫大。由於尚無疫苗與特效藥物,快速、準確的檢驗成為防疫關鍵。PCR/qPCR核酸檢測及血球吸附試驗(HAD)是主要診斷方法,搭配妥善採樣與運送,可有效控制疫情蔓延。
非洲豬瘟(African Swine Fever,簡稱ASF)是近年全球豬隻產業最具威脅性的病毒性疾病之一。由非洲豬瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)所引起的感染,不僅具有高傳染性與高致死率,更因目前尚無有效疫苗與特效治療藥物,使得「快速、準確的檢驗」成為防堵疫情的第一道防線。
一、非洲豬瘟的致病特性與檢測意義
ASFV屬於大型雙股DNA病毒,主要感染家豬與野豬。臨床上可造成高熱、皮膚出血、淋巴結腫大、脾臟腫大等典型症狀,死亡率常高達90%以上。由於臨床症狀與其他豬病(如豬瘟、藍耳病)相似,單憑外觀難以區分,因此「實驗室診斷」是確診的唯一途徑。
目前國際上依據世界動物衛生組織(WOAH,原OIE)手冊建議,非洲豬瘟的診斷方法主要包含病毒抗原檢測與病毒核酸檢測兩大類,並以核酸檢測(PCR或qPCR)為最敏感且具代表性的方法。
二、病毒抗原檢測:血球吸附試驗(Haemadsorption Test,HAD)血球吸附試驗為經典且具特異性的檢測方式,主要以病毒分離(Virus Isolation,VI)為基礎。在操作上,檢體來源包含豬隻的含EDTA抗凝血、脾臟、淋巴結、扁桃腺及腎臟。樣本需保持低溫冷藏送檢,以維持病毒活性。病毒分離過程中,將檢體接種於豬初代單核白血球或肺泡巨噬細胞,若感染ASFV,則細胞表面會出現「紅血球吸附」的現象,形成明顯的血球吸附反應(HAD陽性),即可確認樣本中存在非洲豬瘟病毒。
值得注意的是,雖然大部分ASFV皆具血球吸附性,但仍有極少數毒株不具此特性。這類非吸附型病毒多半毒力較低,但偶爾仍可引發急性臨床症狀,因此仍須輔以分子檢測以確認診斷。
三、病毒核酸檢測:PCR與qPCR技術
核酸檢測為目前最常用且最具敏感度的ASF診斷方法。其原理是透過聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)或即時定量聚合酶鏈反應(quantitative PCR,qPCR)擴增病毒特定基因片段,以檢測樣本中是否存在ASFV核酸。
在臨床應用上,qPCR不僅靈敏度高,且可提供病毒量定量資訊,有助於監測疫情變化與感染階段。尤其在樣本保存條件不佳或病毒量極低時,核酸檢測仍能保持良好的檢出率,為早期偵測與疫情控制的重要工具。
四、檢體採集與運送注意事項
非洲豬瘟病毒對環境相對穩定,但仍需注意樣本保存條件。檢體採集後應立即冷藏(4°C),避免冷凍破壞細胞結構;運送過程須確保低溫鏈完整,以防檢測結果受干擾。
常見送檢樣本包括:
含EDTA抗凝血
脾臟
淋巴結
扁桃腺
腎臟
適當的採樣與運送管理,是檢驗準確性的關鍵環節。
五、結語
非洲豬瘟雖不會感染人類,但其對畜牧產業及糧食安全造成的衝擊不容忽視。從防疫角度看,早期偵測、快速通報與實驗室確認,是阻止疫情蔓延的核心策略。在目前無疫苗、無治療藥物的情況下,建立高效率的核酸檢測系統與嚴謹的生物安全管理,正是守住畜牧防線的關鍵。
參考資料
World Organisation for Animal Health (WOAH, OIE). Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, Chapter 3.9.1. African Swine Fever, 2012.
Gallardo, C. et al. (2019). African swine fever: A global view of the current challenge. Virus Research, 271, 197–209.
王惠芳等(2021)。〈非洲豬瘟之診斷技術與防治現況〉。《動物衛生研究季刊》,67(2),25-34。
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原文出自KingNet國家網路醫藥非洲豬瘟檢驗方法與防控關鍵:從實驗室檢測談起
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